%0 Journal Article
%T GST-NAP融合蛋白可溶性表达及柱上切割GST标签 Expression of Soluble GST-NAP Fusion Protein and GST-tag-cleavage on Column
%A 黄夏冰
%A 康巧珍
%A 傅国
%A 汲振余
%A 刘鑫
%J 郑州大学学报（理学版）
%D 2015
%X 利用基因工程的方法,以实验室保存的p MAL-C2X-NAP质粒为模板,PCR扩增NAP基因,构建重组质粒p GEX-NAP.重组质粒通过酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),再经IPTG低温诱导获得可溶性GST-NAP融合蛋白,最后利用谷胱甘肽琼脂糖凝胶树脂进行纯化,Prescission蛋白酶进行柱上切割去除GST标签.结果表明,p GEX-NAP重组质粒构建正确,在大肠杆菌中经IPTG低温诱导表达,可获得大量可溶性GST-NAP融合蛋白.Prescission蛋白酶柱上切割去除GST标签后,经Western Blot验证NAP蛋白能被兔抗NAP多克隆抗体特异识别.
%K GST-NAP
%K 重组质粒
%K 蛋白表达
%K GST标签
%U http://zzdz.cbpt.cnki.net/WKD/WebPublication/paperDigest.aspx?paperID=cf29543c-8231-4abd-a8a4-e67ad37f6f30