%0 Journal Article
%T 代谢工程改造gluconobactersuboxydans生产2-酮基-d-葡萄糖酸
%A 仪修南
%A 李天明
%A 王北辰
%A 刘金雷
%A 杜红燕
%A 冯惠勇
%J 中国生物工程杂志
%D 2014
%X 2-酮基-d-葡萄糖酸是重要的抗氧化剂和食品添加剂——d-异抗坏血酸的重要前体。弱氧化葡糖酸杆菌(gluconobactersuboxydans)具有丰富的周质空间氧化还原酶类,可将葡萄糖氧化为葡萄糖酸再氧化为2-酮基-d-葡萄糖酸。以提高2-酮基-d-葡萄糖酸的产量和减少副产物为目标,采用同源重组染色体修饰策略,将编码甘油脱氢酶的基因gldh置换为编码葡萄糖脱氢酶的基因gdh,将编码山梨醇脱氢酶的基因sdh置换为编码2-酮-d-葡萄糖酸脱氢酶的基因ga-2-dh。经pcr、酶活性显色及发酵产物hplc检测验证表明:构建的工程菌株gdh和ga-2-dh基因被强化而gldh和sdh被敲除;使用10%的葡萄糖复合培养基,摇瓶发酵72h,工程菌2kga3发酵液中没有副产物5-酮基-葡萄糖酸,2-酮基-d-葡萄糖酸的含量终浓度达到72.3g/l,比野生菌株提高42.2g/l,工程菌和野生菌的2-d-kga质量转化率分别为72.3%和30.1%,工程菌比野生菌提高1.4倍。构建获得的工程菌,不需要外加抗生素,可以保持稳定遗传,对于工业化规模生产具有一定优势,为获得可产业化显示的优势遗传资源打下了基础。
%K 2-酮基-d-葡萄糖酸
%K 弱氧化葡萄糖酸杆菌
%K 葡萄糖氧化酶
%K 2-酮-d-葡萄糖酸脱氢酶
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract16482.shtml