%0 Journal Article %T 应用实时荧光pcr技术检测构巢曲霉的初步研究 %A 刘金华 %A 贺丹 %A 史艳宇 %A 张宇 %A 王丽 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %X 目的根据构巢曲霉(aspergillusnidulans)3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,gapdh)基因特异位点设计并合成taqman探针及引物,建立构巢曲霉实时荧光pcr检测方法。方法应用lasergene7.1软件对构巢曲霉与13种常见曲霉主要包括黑曲霉(a.niger)、烟曲霉(a.fumigatus)、杂色曲霉(a.versicolor)、土曲霉(a.terrus)、黄曲霉(a.flavus)、温特曲霉(a.wentii)、寄生曲霉(a.parasiticus)、泡盛曲霉(a.awamori)、米曲霉(a.oryzae)、棒曲霉(a.cavatus)、赤曲霉(a.ruber)、亮白曲霉(a.ochraceus)及赭曲霉(a.ochraceus)gapdh基因序列比对分析,在特异位点设计引物和探针,建立构巢曲霉实时荧光pcr检测方法,并对该方法进行特异性及敏感性分析。结果用曲霉属22种41株不同曲霉及其他属的12株病原真菌验证实验表明,所建立的荧光pcr方法特异性强;检测灵敏度可达4.03×10-12μg/ml的模板dna。结论应用实时荧光pcr技术能够有效检测构巢曲霉,该方法具有特异、灵敏、快速等特点,可在实际工作中应用。 %K 构巢曲霉 %K 实时荧光pcr %K 检测 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11075.shtml