%0 Journal Article
%T hiv-1gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析
%A 杨凡
%A 刘朝奇
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%X hiv感染引起的aids已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是hiv检测的“金标准”。因此本实验构建gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为hiv抗体测定提供特异、价廉的抗原。选定hiv-1gp160基因中三个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物，用pcr的方法从hiv-1hxb2全基因扩增编码这三个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性，sds-page和westernblot测定融合蛋白的抗原特异性。构建的hiv-1gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒，酶切和测序结果表明基因序列正确，基因全长969bp。在大肠杆菌bl21(de3)中高效表达的重组蛋白分子量为37kda，以包涵体的形式存在。应用westernblot测定10例正常人和12例hiv/aids病人血浆显示hiv-1gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达hiv-1gp160多表位蛋白的原核表达系统，纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。
%K hiv-1
%K gp160
%K 嵌合基因
%K 蛋白表达
%K 免疫原性
%K 免疫印迹
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11801.shtml