%0 Journal Article %T 基于sybrgreeni的双链dna定量方法 %A 刘歆 %A 徐根明 %A 郭江峰 %A 丁先锋 %A 高晓莲 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %X 摘要基于sybrgreeni荧光染料与双链dna(dsdna)结合产生荧光的原理,建立一种高精度、高通量的双链dna定量方法。将梯度稀释后的基因组dna及已知浓度的?dna与等体积的sybrgreeni(4×)充分混合后,利用荧光定量pcr仪采集荧光信号,以rox(1×)作为校正染料进行定量分析;同时利用紫外分光光度计对样品进行平行测定,比较该方法与紫外分光光度法的检测限与准确度。紫外分光光度法的检测限为2ng/?l,而sybrgreeni荧光定量法的检测限可达到0.015ng/?l,并且在0.015~2ng/?l范围内,sybrgreeni荧光强度与?dna浓度呈线性关系(r2=0.9999),比紫外分光光度法灵敏100倍以上,并可准确定量低纯度的dna样品。此方法具有重复性好、高通量的特点,仅需少量的生物样本即可满足定量要求,为分子生物学研究及临床检验等多个领域提供了一种可靠的dsdna定量方法。 %K sybr %K green %K i %K 定量 %K 双链dna %K 基因组dna %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11370.shtml