%0 Journal Article %T 脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及表达产物性质的研究 %A 贾建波 %A 李相前 %A 胡敏 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %X 从环境中筛选到了脂肪酶高产菌株金黄色葡萄球菌jh,依据ncbi上发表的原核微生物脂肪酶基因序列的多序列比对,发现它具有很强的序列保守性。利用pcr从金黄色葡萄球菌jh基因组中扩增得到了脂肪酶基因,利用基因重组技术将其整合到质粒pc194中,并导入到枯草芽孢杆菌中进行表达。应用选择抗药性筛选重组子,利用硫酸铵沉淀法和离子交换层析分离纯化重组脂肪酶,并用ds-page进行纯度鉴定,确定其相对分子量约为32000da。通过对其酶学特性的研究发现,重组脂肪酶在反应温度为41℃,ph为8.0时具有最大活性,其km和vm各自为0.34mm和308μmol?mg-1min-1,ca2+、k+、mg2+能激活这种酶的活性鳩e2+、cu2+、co2+则抑制它的活性。 %K 金黄色葡萄球菌 %K 脂肪酶基因 %K 枯草芽孢杆菌 %K 表达 %K 酶学特性 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11363.shtml