%0 Journal Article %T 猪源戊型肝炎病毒基因iv型orf3编码蛋白的表达及鉴定 %A 屈勇刚 %A 贾鹏 %A 金宁一 %A 陆民 %A 孙中锋 %A 朱光泽 %A 于芳 %A 刘玉生 %A 夏志平 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %X 通过pcr从已构建的猪源戊型肝炎病毒全基因克隆扩增orf3全基因,将扩增产物插入到pmd18-t载体中,亚克隆至原核表达载体pet28a(+),构建pet28a-orf3表达载体,转入e.colibl21(de3),iptg诱导表达。ni-nta层析柱纯化表达蛋白,用sds-page、免疫印迹、elisa等方法分析鉴定表达产物。结果成功扩增到345bp的目的基因;构建了重组表达载体pet28a-orf3;转化宿主菌e.colibl21(de3)后表达产物的相对分子质量在6.50~16.5kda之间,与预期表达的目的蛋白相对分子质量相符;表达的目的蛋白能与阳性猪源和人源血清发生特异性反应,证实其具有较好的反应原性。 %K 戊型肝炎病毒 %K 结构蛋白 %K 原核表达 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11268.shtml