%0 Journal Article %T 利用t载体克隆快速构建布鲁氏菌缺失突变株 %A 白耀霞 %A 杨毅 %A 王玉飞 %A 王同坤 %A 于爽 %A 陈燕芬 %A 付思美 %A 黄留玉 %A 田晋红** %A 陈泽良** %J 中国生物工程杂志 %D 2010 %X 目的:建立一种基于t载体快速克隆构建布鲁氏菌突变株的方法,提高布鲁氏菌突变株构建的效率;方法:采用融合pcr的方法,将待缺失基因上下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合起来,构建突变盒,然后将突变盒直接与t载体连接,构建突变载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得布鲁氏菌的缺失突变株。结果:结合融合pcr和t载体快速克隆,能够在48h之内构建好突变载体,与传统的酶切连接相比,效率高、周期短。结论:基于t载体快速克隆是一种非常高效的构建突变株的方法,为布鲁氏菌突变株的构建提供了一种新方法。 %K 布鲁氏菌 %K t载体 %K 突变株构建 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12452.shtml