%0 Journal Article %T 烟草富含甘氨酸rna结合蛋白在大肠杆菌中的表达 %A 卢秀萍 %A 陈学军 %A 刘勇 %A 唐启慧 %A 陈禹保 %A 李文正** %J 中国生物工程杂志 %D 2010 %X 摘要:目的克隆烟草富含甘氨酸rna结合蛋白基因(glycine-richrna-bindingprotein,gr-rbps)并进行原核表达,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理打下基础。方法从总rna中反转录扩增并克隆烟草富含甘氨酸rna结合蛋白ntrgp-1a和ntrgp-3全长cdna,将cdna序列克隆到表达载体pgex4t-1上,构建了重组表达质粒pgex4t-1/ntrgp-1a、pgex4t-1/ntrgp-3,转化大肠杆菌rosetta,iptg诱导表达,gstrap4b亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,sds-page显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白纯度占总蛋白的95%以上。结论本研究成功克隆和表达了烟草富含甘氨酸rna结合蛋白ntrgp-1a和ntrgp-3基因序列,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理等进一步的研究奠定了基础。 %K 烟草 %K 富含甘氨酸rna结合蛋白 %K 克隆表达 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12383.shtml