%0 Journal Article %T 用无选择标记的转基因烟草表达胸腺素α1(tα1) %A 芦丽亚 %A 宋维 %A 游晓慧 %A 江婷 %A 赵凌侠** %J 中国生物工程杂志 %D 2010 %X 胸腺素α1(thymosinα1,tα1)作为免疫调节剂在t细胞成熟、分化和功能发挥方面扮演着重要角色,临床主要被用于免疫缺陷、病毒感染和自身免疫性疾病(hbv、hcv、hiv和癌症等)的治疗。由于组织提取tα1原料限制、化学合成价格昂贵和传统表达系统(原核或转基因动物)存在安全隐患,使tα1临床应用受限。用烟草表达tα1,首先按植物偏爱密码子设计合成tα1基因(124bp)并重组串联成4×tα1,构建植物双元表达载体p35s∷4×tα1(含twint-dnas),用农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)介导法转化烟草。pcr和southernblot结果证实获得了14转基因烟草,并发现靶基因4×tα1与筛选基因nptii在转基因烟草t0代基因组中发生了分别整合。对177株t1代转基因烟草检测,获得了2株仅整合4×tα1而无筛选标记nptii的植株。elisa结果显示,4×tα1在转基因烟草叶片中的表达量介于180.46(81#)~756.87ng/g·fw(86#),westernblot证实植物源4×tα1具有免疫活性。mtt实验结果显示,植物源的4×tα1蛋白具有促进balb/c鼠脾淋巴细胞增殖的功能,为用安全植物表达系统生产包括tα1在内的药用蛋白提供重要参考。 %K 胸腺素α1 %K 转基因烟草 %K 生物活性 %K 无选择标记 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12261.shtml