%0 Journal Article %T gluconobacteroxydans木糖醇脱氢酶基因的克隆表达及木糖醇的转化分析 %A 沈晓波 %A 齐向辉 %A 朱宏阳 %A 徐虹** %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 从氧化葡萄糖酸杆菌(gluconobacteroxydans)的基因组dna上扩增出木糖醇脱氢酶基因xdh,构建了诱导型表达载体pse-xdh,导入e.colijm109后获得了高效表达木糖醇脱氢酶基因的重组菌jm109/pse-xdh。通过histraphp亲和层析和sephacryls300分子筛两步纯化从细胞中得到纯酶,并对酶学性质进行研究。xdh最适还原反应的ph值为5.0,最适还原反应的温度为35℃;最适氧化反应的ph值为11.0,最适氧化反应的温度为30℃。重组菌中的xdh依赖nadh,对nadh的米氏常数km=57.8mmol/l,最大反应速率vmax=1209.1mmol/(ml·min)。重组菌的xdh酶活力为13.9u/mg。利用重组菌和原始菌混合静止细胞转化d木酮糖,16h28.0g/ld木酮糖生成16.7g/l木糖醇,而原始菌单独转化只生成8.3g/l木糖醇。 %K 葡萄糖氧化杆菌 %K 木糖醇脱氢酶 %K 克隆 %K 表达 %K 木糖醇 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12198.shtml