%0 Journal Article %T 利用red重组系统敲除大肠杆菌o157:h7的waal基因 %A 杨公进 %A 马中瑞 %A 信国 %A 陈敏 %J 中国生物工程杂志 %D 2011 %X 目的:利用λ噬菌体red重组系统敲除大肠杆菌o157:h7的waal基因。方法:以pkd4为模板扩增出与waal基因上下游同源的、含有卡那霉素抗性基因的pcr产物。然后电击转化到大肠杆菌o157:h7中,利用red重组系统,通过卡那霉素抗性基因两侧的waal基因序列在体内与waal基因发生同源重组,置换了o157:h7基因组中的waal基因。并进一步利用卡那霉素抗性基因两侧的frt位点,通过flp位点专一性重组将卡那霉素抗性基因敲除。结果:成功构建了敲除waal基因且不带卡那霉素抗性基因的菌株。 %K o157:h7 %K &lambda %K -red重组系统 %K waal基因 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15634.shtml