%0 Journal Article %T 内毒素结合肽的改良、原核表达及纯化 %A 孙亚丽 %A 刘友生 %A 杨海捷 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 目的:对人内毒素结合肽(endotoxinbindingpeptide,ebp)进行改良,获得突变体mebp(mutateofendotoxinbindingpeptide,mebp)基因并进行原核表达,纯化获得高纯度的mebp。方法:应用pcr定点诱变方法获得mebp基因,构建pinpointxa-3/mebp融合表达载体,在bl21(de3)plyss宿主菌进行表达,溶菌酶裂解法提取包涵体,融合蛋白经pinpointtmxa纯化后,由factorxa酶切,获得目的肽,rp-hplc纯化获得高纯度的mebp。结果应用pcr定点诱变技术完成了ebp第5.18位谷氨酰胺赖氨酸的定点突变,且通过原核表达,色谱纯化获得了高纯度的mebp。结论成功获得高纯度的mebp,为下一步的抗内毒素功能检测奠定基础。 %K 内毒素结合肽 %K 突变 %K 表达 %K 纯化 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11858.shtml