%0 Journal Article %T 金龟子绿僵菌(metarhiziumanisopliaehn1)几丁质酶基因的克隆及高效表达 %A 任文彬 %A 张世清 %A 黄俊生 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。本实验用rt-pcr方法,从本实验室分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌metarhiziumanisopliaehn1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为dq011865,经blastn分析此基因序列与m.anisopliaee6的chi1基因(af02749)同源率为96%。以pet-22b(+)为基础载体,构建pet-chi重组表达载体,在大肠杆菌(escherichia.coli)bl21中进行表达。经sds-page分析,获得了42kda大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63.3%。菌体经冷冻与超声波破碎后,按dns法可测得几丁质酶的活性。 %K 金龟子绿僵菌 %K 几丁质酶基因 %K 大肠杆菌 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11650.shtml