%0 Journal Article %T 重组线虫抗凝肽在毕赤酵母中的表达 %A 姜月华 %A 宋健 %A 王健伟 %A 韩金祥 %A 洪涛 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 目的:获得具有抗凝活性的重组线虫抗凝肽(nap)蛋白,为新型抗凝药物的开发奠定基础。方法:将ppic3.5k-rnap质粒转化毕赤酵母菌株gs115,筛选出阳性菌株后,用甲醇诱导表达。收集酵母培养上清,用sds-page和westernblot分析表达产物,通过测定pt(血浆凝血酶原时间)、inr(血浆凝血酶原国际标准化比率)和aptt(活化部分凝血活酶时间)来验证其生物学活性。结果:获得了稳定表达nap的重组酵母菌株。重组nap被分泌表达,其分子量比预计分子量(8.7kd)稍大,约为10kd左右,可能与糖基化有关。体外活性检测证实其有较强的抗凝活性。结论:在毕赤酵母中成功表达了具有生物学活性的重组线虫抗凝肽,可用于新型抗凝药物的开发。 %K 重组线虫抗凝肽 %K 毕赤酵母 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11651.shtml