%0 Journal Article %T 拟南芥k+转运蛋白atkup1基因的dna改组 %A 郭兆奎 %A 杨谦 %A 姚泉洪 %A 万秀清 %A 颜培强 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 采用同源重组法制备钾离子转运蛋白trk1和trk2缺失的酿酒酵母钾营养缺陷型,通过rna反转录pcr方法从拟南芥幼根扩增获得片段长度为2139bp的atkup1基因,以此片段为模板,采用dna改组技术,经dnasei降解,primerlesspcr,primerpcr,建立atkup1基因突变库。将突变库和未经dna重排处理的atkup1基因分别构建酵母穿梭载体导入k+转运蛋白基因trk1和trk2缺失的酿酒酵母中,分别在低钾(5.0mmkcl)不含色氨酸的培养基上筛选转化子,突变基因库酵母转化子中获得2株长势明显好于atkup1基因转化子的突变基因转化菌株,菌株质粒上的突变atkup1基因核苷酸测序结果发现突变基因atkup1发生2个碱基的置换,造成2个氨基酸的改变,转化烟草烟叶化学成分分析证实突变基因的吸钾活性显著提高。 %K atkup1 %K dna分子进化 %K 酿酒酵母缺陷型 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11649.shtml