%0 Journal Article
%T 一种新型广谱流感病毒亚单位疫苗的表达与纯化
%A 魏义举
%A 龙海亭
%A 杨旭
%A 李建芳
%A 毕研伟
%A 李健峰
%A 徐维明
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%X 通过引物设计，利用重叠延伸pcr（oe-pcr）和搭桥pcr方法扩增得到a型流感病毒m2蛋白缺失跨膜区基因以及ha多表位基因，分别克隆测序后以pet28a+为表达载体构建重组质粒pet28a+-m2d-ha。将重组质粒转化大肠杆菌bl21（de3），筛选获得了高效表达流感病毒缺失跨膜区m2蛋白和ha多表位蛋白片段重组融合蛋白的工程菌，表达的重组蛋白约占菌体总蛋白总量的45%左右。表达的蛋白以包涵体形式存在，包涵体经亲和层析和阴离子交换层析纯化后复性，得到纯度在90%以上的目的蛋白。westernblot结果显示纯化的重组蛋白具有较好的抗原性和特异性。此项工作为进一步研究广谱型流感病毒亚单位疫苗奠定了基础。
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11473.shtml