%0 Journal Article %T 人源溶菌酶基因lyzl4在毕赤酵母中的重组表达及活性测定 %A 李新新 %A 陶建军 %A 余龙 %J 中国生物工程杂志 %D 2014 %X lyzl4是本实验室克隆的一种c型人溶菌酶基因,根据毕赤酵母密码子偏爱性对lyzl4基因进行优化设计,优化后的基因克隆至具有乙醇氧化酶启动子(aox1)的ppic9k载体中。通过电转化方法整合到甲醇营养型毕赤酵母表达菌株gs115基因组上,再利用不同浓度梯度的g418抗性ypd固体培养基筛选高拷贝转化子,经摇瓶发酵后,其上清液在sds-page胶上14.4kda处出现明显的蛋白条带,该蛋白条带经质谱鉴定证实是人lyzl4蛋白。以人溶菌酶(164071u/mg)作为标准品,使用艳红微球菌作为底物,通过比色法测定重组lyzl4溶菌酶蛋白的活性,结果显示重组人溶菌酶lyzl4蛋白具有明显的溶菌活性,其酶活力可达38893u/ml。 %K 重组人溶菌酶lyzl4 %K 毕赤酵母 %K 溶菌活性 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract16228.shtml