%0 Journal Article %T calb脂肪酶在毕赤酵母中的组成型表达及纯化 %A 朱艳飞 %A 杨博** %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 根据南极假丝酵母脂肪酶calb的成熟多肽序列,人工合成了由毕赤酵母(pichia?pastoris)偏爱密码子组成的calb基因序列(仅成熟肽)。将该基因克隆至穿梭质粒pgapzαα中,获得的重组质粒pgapzαacalb经线性化后转入毕赤氏酵母gs115菌株,构建成组成型表达calb的酵母工程菌株。酵母转化子在ypd培养基上传代10次后,其外源基因未丢失。经摇瓶发酵4天后,calb水解活力为14.5u/ml。经脱盐和阴离子交换两步纯化后,其纯度达到了95%以上,目的蛋白的含量达到了220mg/l。 %K lipasebfromcandidaantarctica(calb) %K 毕赤酵母 %K 组成型表达 %K 纯化 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12156.shtml