%0 Journal Article
%T 经合理的序列重组制备花生主要过敏原arah2低致敏衍生物
%A 易海涛
%A 刘芳
%A 夏立新
%A 闫浩
%A 刘飞燕
%A 李建杰
%A 刘志刚
%J 中国生物工程杂志
%D 2011
%X 目的:构建经序列重组的arah2表达载体,表达并纯化该蛋白,鉴定其低致敏原性。方法:根据已鉴定的arah2ige抗原表位,利用基因工程技术将arah2基因进行合理的组合,并将其序列进行合成,再将合成后的基因连入原核表达载体pet-32a(+)上,然后转入origami宿主表达菌中;iptg诱导表达;通过ni2+亲和层析(fplc)纯化目的蛋白;westernblotting和elisa鉴定该重组蛋白的低致敏原性。结果:测序结果表明合成后的序列成功转入原核表达载体pet-32a(+)上。重组蛋白纯化后经sds-page鉴定,目的蛋白大小与理论值相符。westernblotting和elisa结果均表明通过基因工程改造的arah2蛋白(s-arah2)与重组的arah2(r-arah2)蛋白相比,结合花生过敏病人混合血清中ige显著降低。结论:成功构建了经序列重组的arah2表达载体,该基因表达的重组蛋白具有良好的低致敏原性,这将会为花生过敏患者的脱敏治疗提供了新的安全疫苗基础。
%K 花生
%K 重组
%K 过敏原arah2
%K 低致敏衍生物
%K 疫苗
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15561.shtml