%0 Journal Article
%T 乙酰化修饰调控结核杆菌异柠檬酸裂合酶的研究
%A 李瑶瑶
%A 毕静
%A 王艺红
%A 秦云贺
%A 张雪莲
%J 中国生物工程杂志
%D 2015
%X 目的:探索结核杆菌异柠檬酸裂合酶(icl)蛋白322位点赖氨酸(lys322)的乙酰化修饰对蛋白功能的调控作用。方法:构建结核杆菌icl蛋白原核表达载体pet28a-icl,并对lys322位点进行定点突变为精氨酸(arg,r)和谷氨酰胺(glu,q),体外表达纯化获得重组蛋白iclwt、icl322r和icl322q。通过westernblotting和酶活性测定来揭示lys322位点突变前后对蛋白的乙酰化修饰水平及蛋白功能的影响。结果:westernblotting检测发现大肠杆菌表达体系获得的iclwt、icl322r和icl322q蛋白均有较高水平的蛋白赖氨酸乙酰化修饰信号,较iclwt,icl322r和icl322q突变蛋白的酶活性分别下降了大约50%和70%。结论:在大肠杆菌的表达体系中,icl蛋白可以获得乙酰化修饰。icl322q突变蛋白酶活性的显著下降,揭示lys322位点乙酰化修饰对icl蛋白的功能存在负向调控。为未来深入探索赖氨酸乙酰化修饰对结核杆菌代谢,潜伏感染的调控作用奠定了基础。
%K 异柠檬酸裂合酶
%K 乙酰化修饰
%K 定点突变
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract16570.shtml