%0 Journal Article
%T 蛋白质组分析油酸对hepg2细胞转录因子dna结合活性的影响
%A 梁丽珠
%A 孙佳楠
%A 李恺
%A 刘明伟
%A 丁琛
%A 秦钧
%J 中国生物工程杂志
%D 2015
%X 目的:建立由于油酸大量摄入造成的hepg2细胞脂肪变性模型;发现hepg2细胞发生脂肪变性前、后转录因子dna结合活性的差异。方法:将hepg2细胞在含2mmol/l油酸的培养基中培养24h,通过油红o染色鉴定细胞中的甘油三酯含量,并确定发生脂肪变性的程度。分别提取对照组和实验组的核蛋白,利用转录因子富集技术cattfre(aconcatenatedtandemarrayoftheconsensustranscriptionfactorresponseelement),同时运用深度覆盖的蛋白质组学手段,对hepg2细胞脂肪变性前、后的转录因子变化进行动态描绘和定量分析。最后,利用ipa(integratedpathwayanalysis)对dna结合活性发生改变的转录因子进行功能分析。结果:对照组总共鉴定到170种转录因子,实验组总共鉴定到190种转录因子,两组总共鉴定到208种转录因子。hepg2细胞发生脂肪变性后,dna结合活性发生变化的转录因子有101种(重复实验间差异小于2倍,不同处理间差异大于2倍),dna结合活性加强的有67种,减弱的有34种。其中,调节糖代谢、脂代谢的关键转录因子mlx、mlxipl的dna结合活性减弱;nf-κb1的dna结合活性增加,暗示了nf-κb介导的炎症反应的激活。ipa分析的结果表明,油酸激活了hepg2细胞内nrf2介导的氧化应激反应,促进了基因表达(geneexpression)、细胞增殖(cellproliferation)、细胞分化(differentiationofcell)、细胞周期(cellcycle)及细胞存活(cellsurvival)的进程。结论:油酸诱导hepg2细胞脂肪变性会引起细胞内糖、脂代谢的紊乱,诱发炎症反应,并引起氧化损伤,但是在转录水平上,细胞通过加强脂类代谢基因的表达、减少糖类向脂肪酸的转化、促进细胞增殖及激活nrf2介导的氧化应激反应等,最终促进了hepg2细胞的存活。
%K 蛋白质组学
%K 转录因子
%K hepg2细胞
%K 油酸
%K 脂肪变性
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract16556.shtml