%0 Journal Article %T 日本血吸虫三价dna疫苗pvivo2sjfabp/sj26.sjgapdh的构建及其免疫保护作用评价 %A 朱路 %A 龙全科 %A 刘海峰 %A 鲁明波 %A 胡媛 %A 石佑恩 %A 余龙江 %A ** %J 中国生物工程杂志 %D 2010 %X 目的:构建含有日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白(sjfabp),3-磷酸甘油醛脱氢酶(sjgapdh),26kda谷胱甘肽s转移酶(sj26)的三价dna疫苗,并通过药理实验评价其抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法:?以血吸虫成虫rna为模板制备cdna第一链,rt-pcr扩增得到抗原基因片段,再通过重组pcr技术,将sj26和sjgapdh融合为sj26.sjgapdh基因。将sjfabp和sj26.sjgapdh分别克隆入pvivo2的mcs1和mcs2,获得重组质粒pvivo2-sjfabp/sj26.sjgapdh。瞬时转染mcf-7细胞,通过逆转录pcr(rt-pcr)检测抗原基因在mrna水平的表达,通过间接荧光免疫(iif)检测抗原基因在小鼠体内抗原水平表达,验证了dna疫苗的有效性;并免疫小鼠后进行免疫保护性初步试验。结果:?经过酶切、测序及体内外表达验证,该三价dna疫苗pvivo2-sjfabp/sj26.sjgapdh构建成功;该三价dna疫苗在小鼠抗血吸虫感染中诱发减虫率和减卵率达到58.6%和59.8%。结论:?该三价dna疫苗组具有比单价和双价dna疫苗组更加良好的免疫保护作用,为日本血吸虫dna疫苗的研制奠定了基础。 %K 日本血吸虫 %K 脂肪酸结合蛋白 %K 3-磷酸甘油醛脱氢酶 %K 26kda谷胱甘肽s转移酶 %K 三价dna疫苗 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12307.shtml