%0 Journal Article %T 猪戊型肝炎病毒基因orf2片段ag02的融合表达及间接elisa方法的初步建立 %A 张可心 %A 赵敏 %A 郭巍 %A 于敏 %A 赵宇军 %A 相文华 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 采用巢式rt-pcr技术扩增猪戊型肝炎病毒(shev)结构蛋白基因orf2部分片段ag02。将该片段插入pet32a表达载体,命名为pet-hev,将重组表达质粒转化大肠杆菌bl21(de-3),经1mmiptg诱导得到表达,进行sds-page分析,证明该片段得到融合表达,分子量为33kd。westernblot分析表明,重组蛋白可以与hev阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。以纯化的重组蛋白建立了初步的间接elisa方法,经方阵滴定确定最佳包被浓度为2.43μg/ml,血清最佳的稀释比为1:40,与万泰试剂盒相比较,证明我们建立的elisa方法有较高的特异性和敏感性。 %K 戊型肝炎病毒 %K orf2片段 %K 原核表达 %K 克隆 %K 间接elisa %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11852.shtml