%0 Journal Article %T 人hmgb1分子的克隆、重组蛋白表达与生物学活性 %A 刘洪波 %A 范学工 %A haichao %A wang %A 彭建萍 %A 黄建军 %A 李宁 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 采用rt-pcr,从重症肝炎病人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcellspbmcs)的mrna中扩增高迁移率族蛋白1(highmobilitygroupbox-1protein,hmgb1)基因,构建重组表达质粒pgex4t-1-hmgb1,转化入大肠杆菌,测序证实其序列与基因数据库中hmgb1基因(nm_002128)一致。诱导表达的融合蛋白gst-hmgb1,用glutathionesepharose4b亲和层析纯化,经thrombin酶切得到hmgb1。结果显示:经western-blotting检测,gst-hmgb1和hmgb1均具有免疫活性;elisa和mtt检测发现,两者均能刺激raw264.7细胞产生大量tnf-α,明显刺激hela细胞增殖。gst-hmgb1具有良好的生物学活性,为今后的研究打下了基础。 %K 克隆 %K hmgb1 %K 原核表达 %K 纯化 %K 免疫活性 %K 生物学活性 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11636.shtml