%0 Journal Article %T 利用移码突变和终止密码子提高下游目的基因的表达水平 %A 陈斌 %A 李建彬 %A 米志强 %A 安小平 %A 李存 %A 刘大斌 %A 姜焕焕 %A 王娟 %A 黄芬 %A 张宝中 %A 范华昊 %A 何后军 %A 童贻刚 %J 中国生物工程杂志 %D 2011 %X 目的:在基因结构复杂的慢病毒载体插入报告基因并提高目的基因表达量。方法:慢病毒载体上有复杂的基因排列,为了不影响慢病毒载体的活性,必须尽量保留原有的基因,替换不必要的基因。首先将报告基因萤光素酶插入慢病毒载体替换基因env后,结果检测不到报告基因的表达。为了提高报告基因的表达水平,将报告基因的读码框向后移动一个碱基,同时在其上游增加一个终止密码子,然后检测报告基因的表达水平。结果:通过移动报告基因的读码框同时在上游增加终止密码子,使报告基因的表达水平大大提高。结论:在构建基因表达载体时,通过改变目的基因与上游起始密码子atg之间的相对位置以及增加终止密码子,可以大幅提高目的基因的表达水平。 %K 慢病毒载体 %K 报告基因 %K 基因表达 %K 定点突变 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15590.shtml