%0 Journal Article
%T 梅毒螺旋体重组抗原的表达及在梅毒血清学诊断中的应用
%A 卢海蓉|王晓红|陈少娟|王峰|章刚|黄德新
%J 中国生物工程杂志
%D 2009
%X 目的：克隆、表达梅毒螺旋体（treponemapallidum,tp）膜蛋白tpn47、tpn17、tpn44.5和tpn15，建立双抗原夹心elisa法，探讨其在梅毒血清学诊断中的应用。方法：应用聚合酶链反应法（pcr）从tp全基因组中扩增4个目的片段，克隆到载体pet-ht-jkm中，在bl21(de3)plyss菌中诱导表达，ni-nta亲和层析法纯化重组蛋白，辣根过氧化物酶标记，双抗原夹心酶联免疫吸附法检测人血清中的特异性igm和igg抗体。结果：成功表达了4种重组蛋白用作elisa包被和酶标抗原检测国家tp参比血清，特异性和灵敏度均为100％；检测385份临床血清样本，结果与tppa法相比符合率达到99％（p＜0.01），灵敏度和特异性分别为98.2%（162/165）和99.5%（219/220）。结论：表达的4种重组抗原具有很好的生物活性，为理想的梅毒的血清学诊断用抗原。以这4种表达蛋白为基础建立的双抗原夹心elisa法灵敏度高，特异性好，而且方法简单，结果客观，易于自动化操作，值得临床大力推广。
%K 双抗原夹心酶联免疫吸附试验
%K 重组蛋白
%K 梅毒螺旋体
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12050.shtml