%0 Journal Article
%T 黄曲霉毒素解毒酶在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及其圆二色谱分析
%A 胡熔
%A 刘大岭
%A 谢春芳
%A 姚冬生
%J 中国生物工程杂志
%D 2011
%X 目的:应用原核表达系统对黄曲霉毒素解毒酶(aflatoxin-detoxifizyme,adtz)进行高效可溶表达和纯化,并对其进行生物学活性与二级结构分析。方法与结果:亚克隆adtz的成熟肽,并构建与pmal-c2x的重组质粒,转化大肠杆菌rosetta(de3),iptg诱导实现了mbp_adtz融合蛋白的高效可溶表达,其表达量约占总蛋白的50%。经amylose亲和层析、factorxa酶切和疏水层析后得到高纯度的radtz蛋白。生物学活性分析表明radtz蛋白具有降解afb1的酶活性,酶比活为136u/mg。圆二色光谱对radtz蛋白二级结构的分析结果为:α-螺旋为43.3%、β-折叠为31.1%、β-转角为10.5%和无规则卷曲为15.1%。结论:用大肠杆菌成功表达并得到高纯度有活性的radtz蛋白,为进一步对radtz结构与功能研究奠定了基础。
%K 黄曲霉毒素解毒酶
%K mbp_adtz融合蛋白
%K 可溶性表达
%K 圆二色谱
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15477.shtml