%0 Journal Article
%T 带his-tag的解脂耶氏酵母脂肪酶lip2在毕赤酵母中的表达及纯化
%A 汪小锋
%A 申旭光
%A 赵鹤云
%A 孙永川
%A 纪昌涛
%A 闫云君
%J 中国生物工程杂志
%D 2011
%X 将去自身信号肽并且n-端带6×his标签的yllip2基因克隆至表达载体ppic9k中,电转化gs115获得高效表达脂肪酶his6-yllip2的基因工程菌。筛选到的阳性克隆子摇瓶发酵脂肪酶活力最高为400u/ml。对重组毕赤酵母在10l发酵罐中表达his6-yllip2的分批补料发酵工艺进行了初步优化,探讨了培养基、ph、温度对生物量和重组蛋白表达量的影响。结果表明:采用fm22培养基,诱导温度为25℃,ph5.0,甲醇诱导114h后his6-yllip2的最高酶活力达到3160u/ml。sds-page分析表明,蛋白的分子量大约为38kda。重组的his6-yllip2经镍柱一步纯化后的纯度达到95.43%,比酶活达到4250u/mg。
%K 毕赤酵母
%K 解脂耶氏酵母
%K 组氨酸标签
%K 高密度发酵
%K 脂肪酶
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15474.shtml