%0 Journal Article %T 化学发光southernblot法检测hbv体外复制及其应用于药物对hbv的抑制分析 %A 易学瑞 %A 袁有成 %A 陈文吟 %A 苏蔚 %A 张峰 %A 刘振扬 %A 孔祥平 %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 目的:建立化学发光southernblot检测细胞内hbvdna的方法,同时检测3种不同靶点抗乙肝药物的体外作用。方法:用地高辛标记hbv探针,优化杂交条件,检测来自hepg2及hepg2.2.15hbvdna复制中间体;利用建立的化学发光southernblot检测hbvdna的方法检测经拉米夫定、bay41-4109、α-galcer以不同药物浓度处理的hepg2.2.15hbvdna复制中间体的水平。结果:(1)标记的hbv探针的检测灵敏度为0.1pg,杂交系统的检测灵敏度为1pg,可检测到hepg2.2.15细胞内的hbvdna特异性信号;(2)以该法检测胞内hbvdna可见3种药物都有明显的抑制作用,其半数有效量(ic50)分别为1.53μmol/l、0.41μmol/l、0.01μmol/l。结论:胞质hbvdna的水平能准确地反映不同靶点抗hbv药物的抗病毒效果,建议在观察药物特别是中药抗病毒研究中采用。 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12043.shtml