%0 Journal Article %T 用fret方法研究与mps1蛋白有相互作用的cenp-e蛋白结构域 %A 刘子杰 %A 翁亚光 %A 李素彦 %A 施琼 %A 蔡燕 %A 刘斌 %A 张燕 %A 阎琛 %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 目的:探索与mps1蛋白有相互作用的cenp-e蛋白结构域。方法:将重组质粒pegfp-cenpe2(674~1085位氨基酸)、pegfp-cenpe3(1200~2134位氨基酸)转染人胚肾293(hek293)细胞,采用受体漂白荧光共振能量转移方法(fret方法),检测egfp-cenpe2、egfp-cenpe3和mps1间的能量转移率(ef),进一步用免疫共沉淀方法验证fret的实验结果。结果:重组质粒转染hek293细胞后经激光共聚焦显微镜观察重组质粒表达的融合蛋白与mps1都存在着共定位;fret检测结果显示egfp-cenpe3和mps1间的能量转移率为[(12.63±0.48)%,n=30],pegfp-cenpe2和mps1间的能量转移率为[(3.07±0.21)%,n=30],与对照组[(2.96±0.27)%,n=30]比较pegfp-cenpe3和mps1间的能量转移率差异存在显著性(p<0.05),免疫共沉淀实验结果显示egfp-cenpe3与mps1蛋白间存在相互作用。结论:fret技术和免疫共沉淀实验证明了egfp-cenpe3与mps1间存在着相互作用。 %K cenp-e %K mps1 %K 蛋白质相互作用 %K 荧光共振能量转移 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12014.shtml