%0 Journal Article %T 新型抗2-型糖尿病基因重组rmbay的克隆、表达及生产环节优化 %A 马义 %A 余榕捷 %A 曾乐 %A 谢珊珊 %A 洪岸 %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 利用基因重组方法构建rmbay的原核表达载体pky-bay,并研究其生产的优化条件。选用大肠杆菌偏爱密码子,用pcr方法合成全长rmbay多肽基因,并定向插入到高效表达载体pkyb-mcs中,用大肠杆菌er2566进行表达,融合蛋白经chitin-beads柱纯化后,结合在柱上的融合蛋白用β-巯基乙醇诱导蛋白内含肽的n端自动切割,释放目的肽,目的肽由质谱鉴定。实验结果表明:利用载体pky-b在大肠杆菌er2566中,rmbay能够实现高效表达;在优化的生产条件下,rmbay的产量可达到6.7mg/l发酵产物,纯度大于98%,质谱鉴定rmbay的分子量为3.887kda.与理论值相符合。 %K 基因重组生产优化2-型糖尿病质谱 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12013.shtml