%0 Journal Article %T 假密环菌cdna文库的构建及其阿拉伯糖苷酶基因的克隆(英文) %A 姚冬生 %A 黄辉 %A 赵龙 %A 谢春芳 %A 刘大岭 %J 中国生物工程杂志 %D 2005 %X 用smart技术构建了载体为λtriplex2的假密环菌的表达型cdna文库。文库滴度为1.0×106pfu/ml,重组率约为98.3%,扩增后滴度为3.1×108pfu/ml,容量约为4.2×1010。从文库中随机挑选176个克隆进行5’端测序,得到147条表达序列标签(est),并将测序结果提交到embl数据库。随机测序结果表明:插入片段长度均在200-800之间。测序结果经过生物信息学分析,发现有43条序列与已知序列有明显同源性,其中序列aj620046与多形拟杆菌的阿拉伯糖苷酶序列有很高的序列一致性。用smart-race技术成功获得了aj620046的全长cdna,克隆了aj620046的开放阅读框af,并成功构建了重组质粒phil-s1-af,在毕赤酵母菌中进行了初步表达。 %K 假密环菌 %K 生物信息学 %K 阿拉伯糖苷酶 %K 克隆 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15191.shtml