%0 Journal Article
%T 霍乱毒素b亚单位与胰岛素b链融合基因的克隆及原核表达分析
%A 陈丽
%A 欧阳凤秀
%A 钱炳俊
%A 任宏
%A 王强
%A 姜庆五
%A 王玉炯
%A 刘静波
%A 梁婉琪
%A 潘爱虎
%J 中国生物工程杂志
%D 2005
%X 构建了霍乱毒素b亚单位(choleratoxinbsubunit,ctb)与胰岛素(insulin)b链的融合基因ctb-insb,将该融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pet-30a(+)中,获得重组质粒petcib;并将该质粒转入大肠杆菌菌株bl21(de3)中;重组菌株经iptg诱导后的表达产物经15％sds-page分析表明可以表达融合蛋白,其分子量约为15.4kda,且主要以包涵体形式存在,约占全菌蛋白的30％。含ctb-insb重组蛋白的包涵体经变性和复性后,可在体外自组装成五聚体结构。westernblotting分析结果显示ctb-insb可分别被霍乱毒素的抗体和胰岛素的抗体识别,表明该蛋白具有霍乱毒素b亚单位与胰岛素的双重抗原性。同时gm1-elisa分析结果表明ctb-insb在体外可与神经节苷脂gm1(monosialoganglioside)特异结合,进一步证实了它能够形成类似ctb五聚体的高级结构,具有生物活性。
%K 霍乱毒素b亚单位
%K 胰岛素b链
%K 融合基因ctb-insb
%K 原核表达
%K 神经节苷脂gm1
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15179.shtml