%0 Journal Article %T 重组人色素上皮细胞衍生因子融合蛋白的制备及其抑制新生血管 %A 王亚妮 %A 刘先宁 %A 朱娟莉 %A 安娜 %A 朱秀萍 %J 中国生物工程杂志 %D 2008 %X 目的:人色素上皮细胞衍生因子(pigmentepithelium-derivedfactor,pedf)是一种有效的新生血管形成抑制因子和神经营养因子。本文通过原核细胞表达人pedf蛋白,鉴定其抑制新生血管的生物学活性。方法:采用pcr法扩增人pedfcdna,将其克隆到pet32a载体中,在大肠杆菌bl21中表达人pedf蛋白。经sds-page和western-blot鉴定后,镍柱亲和层析法变性条件下纯化重组融合蛋白。bradford法测蛋白浓度,采用鸡胚脲囊膜法测其对新生血管形成的影响。结果:成功构建了pet32a-pedf表达载体。重组人pedf蛋白在bl21宿主菌中获得了稳定高效表达,鸡胚脲囊膜实验结果显示在重组蛋白浓度为0.4、0.04ng/ml时均有对新生血管的显著抑制作用(p<0.01),而在4ng/ml时无抑制作用。结论:成功高效表达及纯化了重组人pedf蛋白,鉴定其抑制新生血管的生物学活性,并且证实该活性在一定范围内有效,为进一步研究其功能及推广应用奠定了基础。 %K 人色素上皮细胞衍生因子 %K 原核表达 %K 新生血管 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11634.shtml