%0 Journal Article %T ⅰ型单纯疱疹病毒gd基因片段的高效表达及抗原性分析 %A 易俊波 %A 雷明军 %A 王晓红 %A 陈少娟 %A 黄德新 %A 李凌云 %J 中国生物工程杂志 %D 2006 %X 目的获得高表达的ⅰ型单纯疱疹病毒(hsv)被膜糖蛋白gd(简称gd1)基因的工程菌。方法通过计算机分析,筛选出疱疹病毒gd1中优势抗原决定簇的基因片段。将克隆的基因片段插入表达载体ptrxa内,转化大肠杆菌rosetta,以异丙基-β-d-硫代半乳糖苷诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)分析表达产物。 结果 pcr扩增出约930bp的gd1编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变;所构建ptrxa-gd1重组表达质粒阳性克隆经pcr与双酶切鉴定,与预期结果一致;含有ptrxa-gd1重组质粒的大肠杆菌rosetta诱导后得到了高效达,sds-page显示表达产物约mr48000(dalton)。免疫印迹结果表明表达产物具有较好的抗原性。结论 成功构建了ptrxa-gd1表达质粒,实现了成熟gd1蛋白在大肠杆菌中的高效表达,表达产物具有好的抗原性。 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11789.shtml