%0 Journal Article
%T k202a突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的影响
%A 邹有土
%A 吴义真
%A 施文芳
%A 林琳
%J 中国生物工程杂志
%D 2007
%X 利用易错pcr定向进化扩展青霉脂肪酶（pel），获得了一株热稳定性有所提高的随机突变体（ep8）,ep8包含有一个氨基酸的改变。为进一步提高其热稳定性，作者利用重叠延伸pcr法，以ep8基因为模板，将第202位赖氨酸突变为丙氨酸（k202a），构建表达质粒pao815-ep8-k202a。并将其引入毕赤酵母gs115构建叠加突变体(pel-ep8-k202a)。同时以野生型lip07为模板构建单点突变体:pel-lip07-k202a。15%sds-page结果分析表明突变体分子量与野生型一致，约为28kd.表达产物热稳定性分析结果表明:野生型（pel）的tm值为39.03℃，而以野生型为模板进行定点突变得到的单点突变酶（pel-lip07-k202a），其tm却降低了2℃，为37.08℃。叠加突变酶(pel-ep8-k202a)的tm为41.66℃,比野生型酶提高2.63℃，比随机突变体ep8生产的酶（pel-ep8）的tm提高了1.21℃。
%K 扩展青霉脂肪酶
%K 定点突变
%K 热稳定性
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11442.shtml