%0 Journal Article
%T 芽孢杆菌β-折叠桶植酸酶的原核可溶性表达优化及包涵体复性研究
%A 李倩倩
%A 李中媛
%A 冯舵
%A 黄火清
%A 韩翠晓
%A 杨培龙
%A 姚斌
%A 高伟
%J 中国生物工程杂志
%D 2012
%X 目的:来源于芽孢杆菌的β-折叠桶植酸酶基因phyh,截去n端120个碱基编码的40个氨基酸后,成功构建了原核表达体系,通过两种方法分别得到有活性的目的蛋白phyht,并通过进一步纯化提高目的蛋白的纯度。方法:通过分子伴侣共表达系统提高目的蛋白的可溶性表达,并通过包涵体复性研究,从包涵体中制备出有活性的目的蛋白。结果:(1)目的蛋白phyht主要以包涵体形式存在于沉淀中;(2)通过优化表达条件,降低温度和诱导剂浓度均不能明显改善包涵体问题,通过构建分子伴侣共表达系统(即pg-kje8、pgro7、pkje7和ptf164种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pet28b-phyht共表达),筛选能提高目的蛋白可溶性表达的分子伴侣质粒;(3)包涵体经过复性和进一步的纯化,得到了高纯度的有生物活性的目的蛋白。
%K β-折叠桶植酸酶phyht
%K 分子伴侣
%K 可溶性表达
%K 包涵体
%K 蛋白纯化
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract15853.shtml