%0 Journal Article
%T 人纤溶酶原饼环区5(hpk5)基因的分泌型表达
%A 牛勃
%A 陈显久
%A 张东昌
%A 解军
%A 张悦红
%A 杨琦
%A 程牛亮
%J 中国生物工程杂志
%D 2003
%X 构建人纤溶酶原饼环区5(hpk5)基因的原核可溶性表达载体并进行表达和纯化,获取大量高纯度、具有生物活性的hpk5蛋白。以纤溶酶原cdna为模板,pcr扩增了hpk5基因,经过适当酶切后构建表达载体pet22b(+)hpk5,转入大肠杆菌bl21(de3)进行表达并经组氨酸亲和层析获得纯化。带有重组质粒pet22b(+)hpk5的大肠杆菌经iptg诱导后以可溶性形式表达16kda的蛋白,其表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化后目的蛋白纯度达95%以上,western印迹表明重组蛋白具有histag抗原活性。构建了pet22b(+)hpk5重组质粒并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达,为获得大量hpk5基因工程产品奠定了实验基础。
%K 人纤溶酶原饼环区5
%K 基因克隆
%K 原核表达
%U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract14430.shtml