%0 Journal Article
%T 黏蛋白1基因磁转染树突状细胞诱导细胞毒性t细胞抗膀胱肿瘤免疫效应的研究
%A 孙璇
%A 夏昕晖
%A 廖育芬
%A 张东方
%A 王固新
%A 罗刚
%J 癌变·畸变·突变
%D 2011
%X ？探讨黏蛋白1(mucins1,muc1)基因磁转染体外人树突状细胞(dendriticcell,dc）的可行性，观察其诱导的特异性抗muc1膀胱癌ctl的免疫效应。方法：以葡聚糖磁性纳米颗粒(dmn）作为载体，在多聚赖氨酸(pll）的辅助下，通过静电作用结合muc1基因的真核表达载体pegfp-c1-muc1，在钕－铁－硼稀土强磁块的磁场作用下转染dc，荧光显微镜下观察及流式细胞术检测转染效率，并用rt-pcr法检测转基因dc中muc1基因的表达；再将转染muc1基因的dc与自体t细胞共培养，并分别用乳酸脱氢酶释放法检测所致敏的细胞毒性t淋巴细胞(cytotoxiclymphocyte，ctl）对muc1特异性抗膀胱癌(膀胱肿瘤biu87细胞系）的杀伤活性，用透射电镜观察ctl诱导靶细胞凋亡情况；elisa法测定muc1基因修饰后的dc刺激自体t细胞分泌ifn－γ的能力。结果：pegfp-c1-muc1转染效率为10％左右，荧光显微镜下可观察到明显绿色荧光蛋白的表达，rt-pcr法可检测到muc1条带，转染muc1基因的dc与自体t细胞混合培养后能诱导出muc1特异性的ctl，对biu87细胞的杀伤实验表明t-dc-muc1的杀伤活性显著高于对照组t-dc-pegfp-c1和t-dc诱导的ctl(p均＜0.05)；在透射电镜下也可观察到部分biu87膀胱肿瘤细胞出现了细胞核核仁消失，染色质浓集于核膜周围等早期凋亡表现；基因修饰后的dc能刺激自体t细胞分泌高水平的ifn－γ，明显高于未转染的dc(p<0.05）。结论：葡聚糖磁性纳米颗粒在固定磁场的作用下成功将muc1基因转入dc，并可有效诱导出特异性抗muc1膀胱癌的细胞毒性t细胞
%K muc1基因
%K 膀胱癌
%K 人树突状细胞
%K 免疫效应
%K 葡聚糖磁性纳米颗粒
%K 转染
%U http://www.egh.net.cn/CN/abstract/abstract2079.shtml