%0 Journal Article %T 小鼠腔前卵泡三维培养成熟后受精体系的建立及优化 %A 曾荔苹 %A 王晓梅 %A *侯震晖 %A 林桂淼 %A 李慧 %A 林苏霞 %A 林晓潭 %A 朱玥荃 %A 蔡志明 %J 癌变·畸变·突变 %D 2013 %X ?目的:建立小鼠腔前卵泡体外海藻酸盐包埋培养的三维培养(3-dimensionsinvitrogrowth,3d-ivg)方法以及成熟卵母细胞体外受精体系。方法:采用机械法分离12日龄雌性昆明小鼠卵巢,获取结构完整的腔前卵泡,腔前卵泡经过包埋后体外立体化培养,激素超排,收集黏液化的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte-complex,cocs),分别计数发泡期(germinalvesicle,gv)卵母细胞、生发泡破裂期(germinalvesiclebreakdown,gvbd)卵母细胞和含有第一极体(firstpolarbody,pb)卵母细胞,制备卵母细胞染色体并进行c带染色分析。同时设小鼠体内超排卵母细胞(invivoconvention,ivc)作为对照。再将体外培养成熟的卵母细胞与获能后的小鼠精子受精,观察受精情况。结果:经过3d-ivg,卵泡存活率为82.5%,卵泡发育过程维持完整的三维结构,卵泡直径增长迅速,培养6d后,有91.7%成腔;在激素超排后,有82.6%cocs黏液化。gv、gvbd和含有pb的成熟卵母细胞分别为6.1%,45.4%和48.5%。3d-ivg获得的成熟卵母细胞百分率(48.5%)明显低于体内超排成熟卵母细胞百分率(82.9%),差异有统计学意义(p<0.05)。但3d-ivg所获得的卵母细胞染色体c带分析表明染色体数目为20条,结构未见异常,与体内超排卵母细胞一致。并观察到3d-ivg培养成熟的卵母细胞可以受精成功。结论:建立并完善了小鼠腔前卵泡的三维体外培养体系,为生殖毒性实验研究和胚胎工程研究提供了新的方法。 %K 小鼠 %K 腔前卵泡 %K 三维培养 %U http://www.egh.net.cn/CN/abstract/abstract3266.shtml