%0 Journal Article %T pires2-egfp-daz3质粒构建及金黄地鼠2-细胞胚中人daz基因的复制与表达 %A 徐珊珊 %A 黄天华 %A 谢庆东 %A 吴丛梅 %A 吴德生 %J 癌变·畸变·突变 %D 2006 %X ?背景与目的:人yq11.2上azf区(内含daz基因家族)的缺失是多数男性不育的病因。本研究旨在探讨daz3基因导入精子的可能性以及导入基因在2-细胞胚中的功能。材料与方法:构建pires2-egfp-daz3质粒,经鉴定无误后将其导入金黄地鼠精子。将携带daz3基因的精子与金黄地鼠卵母细胞进行体外受精。用fish、pcr、rt-pcr技术分别检测daz3基因在精子头部、雄原核上的整合以及在2-细胞胚中的复制与表达。结果:构建的pires2-egfp-daz3质粒经酶切、pcr和绿色荧光蛋白表达鉴定构建成功。采用fish在精子头部、单细胞胚雄原核和2-细胞胚两个间期核上观察到阳性杂交信号。采用rt-pcr在2-细胞胚样本中观察到daz3cdna的特异条带。结论:外源性daz3基因能被导入精子基因组。携带daz3基因的精子可与卵母细胞完成正常的受精过程。导入的daz3基因在早期胚胎细胞中能够随细胞分裂自我复制并表达其功能。本研究结果为daz基因缺失所致男性不育的治疗提供了新的线索。 %K 人daz基因 %K 男性不育 %K pires2-egfp-daz3质粒复制与表达 %K 金黄地鼠 %U http://www.egh.net.cn/CN/abstract/abstract1290.shtml