%0 Journal Article %T pcegr-ifnγ重组质粒的构建与体外x射线诱导表达特性 %A 吴丛梅 %A 李修义 %J 癌变·畸变·突变 %D 2003 %X ?目的:扩增小鼠ifnγcdna全长并构建pcegr-ifnγ重组质粒,研究该重组质粒在不同剂量x射线作用下在b16细胞中的表达及时程。方法:利用pcr方法扩增小鼠ifnγcdna全长,插入pcdna3.1质粒的多克隆位点,用egr-1的启动子替代pcdna3.1质粒的cmv启动子,构建成pcegr-ifnγ重组质粒;通过脂质体转染法将重组质粒转染入b16细胞,利用elisa试剂盒检测在不同剂量x射线作用下,重组质粒的表达量及表达时程。结果:ifnγcdna的扩增产物经测序,结果基本与已知序列相符,重组质粒经酶切鉴定,得出相应的特异带。不同剂量x射线照射后,pcegr-ifnγ在b16细胞中表达量为77.73~94.60pg/ml,明显高于对照组(p<0.05~p<0.01);2gyx射线照射后6h,pcegr-ifnγ表达量最高,为90.00pg/ml,明显高于对照组(p<0.001)。结论:用本实验克隆的ifnγcdna所构建的pcegr-ifnγ重组质粒,经x射线的诱导,在被转染的b16细胞中表达量明显增高。对重组质粒x射线诱导表达的剂量时程的检测,为将来pcegr-ifnγ基因治疗合并放疗的体内研究奠定了基础。 %K ifnγ表达 %K pcr %K 质粒构建 %K x射线照射 %K 时程 %K 剂量效应 %U http://www.egh.net.cn/CN/abstract/abstract767.shtml