%0 Journal Article %T 酿酒酵母pdc1基因过表达菌株的构建 %A 柯崇榕 %A 吴毕莎 %A 邵庆伟 %A 杨威 %A 黄建忠 %J 应用与环境生物学报 %P 704-708 %D 2013 %R 10.3724/SP.J.1145.2013.00704 %X 扩增pdc1全长和kan基因,构建带有kanr和ampr的整合表达载体psh-pdc1,线性化后liac/sscarrierdna/peg法高效转化酿酒酵母ys2-△adh2-△ald6.g418结合pcr筛选获得阳性转化子,然后转入psh65质粒,半乳糖诱导表达cre酶切除kan基因,获得pdc1过表达菌株.荧光定量pcr分析表明过表达菌株pdc1的mrna表达量是出发菌株的2.078倍,遗传性能稳定,生长情况与出发菌株无明显差异.发酵试验显示过表达菌株蔗糖消耗速率较出发菌株缓慢,乙醇最大积累量为72h的12.03%,提高了5.62%.利用同源重组原理和cre-loxp系统,成功构建pdc1基因过表达突变株并提高了乙醇产量.图6表3参17 %K 酿酒酵母 %K pdc1 %K 基因过表达 %K 荧光定量pcr %K 乙醇发酵 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201207019