%0 Journal Article %T 木薯醇腈酶cdna的克隆及其在甲醇酵母中的初步表达 %A 王丹 %A 李维 %A 万洁 %A 王春红 %J 应用与环境生物学报 %P 428-431 %D 2004 %X 摘要α?醇腈酶(α?hydroxynitrilelyase,hnl)作为一种生物催化剂,能可逆地催化hcn和醛或酮类化合物反应生成手性氰醇化合物或手性药物.运用rt-pcr从木薯幼叶组织中扩增出hnl全长cdna序列,将其克隆至质粒pbluescriptsk中进行序列分析.结果表明:克隆的cdna片段和文献报道的4个木薯hnlcdna相比,核苷酸同源性最高为99.1%,氨基酸同源性最高为98.8%.利用pcr将其再克隆到酵母表达质粒ppic3.5k上,通过原生质体转化、发酵等一系列步骤,首次在甲醇酵母(pichiapastoris)中表达了木薯hnlcdna.每升发酵液可获得5040个单位的hnl.图4参13 %K 关键词木薯醇腈酶cdna %K 木薯 %K 克隆 %K 甲醇酵母 %K 表达 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=1195