%0 Journal Article
%T 扩展细胞色素p4502a6对大位阻底物的适应性
%A 唐德芳
%A 张志刚
%A 裴小琼
%A 袁帅
%A 胡承
%A 吴中柳
%J 应用与环境生物学报
%P 59-63
%D 2009
%R 10.3724/SP.J.1145.2009.00059
%X 细胞色素p450酶(p450)的分子改造及其催化的生物转化是当前的两个研究热点.本研究以扩展p4502a6的底物适应性为目标，通过尝试对p4502a6酶进行n-端修饰提高表达量、筛选随机突变库以及点突变改变活性位点重要氨基酸残基等手段，在两个随机突变体中未筛选到功能突变体，但通过点突变重要氨基酸残基获得了新的突变体p4502a6(n297q/i300a).该突变体具有比野生型和已报道的其它突变体更广泛的底物适应性，能够催化氧化大位阻底物6-苄氧基吲哚(6-obzl-indole)生成蓝绿色物质.该物质经质谱测定为靛蓝类二聚体化合物.实验表明，其中两个氨基酸残基的变化都是关键突变，此结果与最新的p4502a6突变体晶体结构研究相符.计算机模拟显示，i300a突变导致活性口袋在铁卟啉环的垂直和水平方向都增大，使其能接纳在两个方向都有位阻的底物；而297位的天冬酰胺是一个功能保守的残基，n297q的变化可能与氢键等弱作用有关.图4表1参29
%K 细胞色素p4502a6
%K cyp2a6
%K 点突变
%K 生物转化
%K 6-苄氧基吲哚
%U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=20090111