%0 Journal Article %T 产琥珀酸重组大肠杆菌的构建和发酵性能 %A 曹剑磊 %A 周丽 %A 张梁 %A 王正祥 %A 石贵阳 %J 应用与环境生物学报 %P 851-857 %D 2010 %R 10.3724/SP.J.1145.2010.00851 %X 琥珀酸是一种重要的化工产品,微生物发酵法生产琥珀酸具有广阔的应用前景.野生大肠杆菌厌氧发酵产物中琥珀酸含量低,且有大量副产物.为构建高产琥珀酸的重组大肠杆菌,阻断代谢旁路,利用xer/dif重组酶系统对escherichiacolicicimb0013进行代谢途径的调控研究.结果显示,敲除了包括乙酸激酶和磷酸乙酰转移酶基因(acka-pta)、乳酸脱氢酶基因(ldha)、丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflb)、乙醇脱氢酶基因(adhe)等琥珀酸合成竞争途径中关键酶基因的重组大肠杆菌菌株e.colicicimb0013-1040,其发酵液中琥珀酸成为主要产物得到积累;进一步对其pts系统进行修饰并适当增强pep羧化酶基因(ppc)表达剂量,成功获得一株具备较强琥珀酸生产能力的菌株e.colicicimb0013-1050(pth-ppc),该菌株厌氧转化葡萄糖36h,琥珀酸产量达到36.2g/l,生产强度为1.01gl-1h-1,葡萄糖-琥珀酸转化率为64.3%,发酵液经高效液相色谱(hplc)检测,无乳酸、乙酸、甲酸、乙醇生成.图7表4参18 %K 琥珀酸 %K 重组大肠杆菌 %K 代谢调控 %K 基因敲除 %K xer/dif重组酶系统 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201002008