%0 Journal Article
%T 顺丁烯二酸异构酶工程菌发酵条件优化
%A 刘祥涛
%A 赵青
%A 任杰
%A 李正华
%A 王昌禄
%A 吴洽庆
%A 朱敦明
%J 应用与环境生物学报
%P 558-562
%D 2011
%R 10.3724/SP.J.1145.2011.00558
%X 为提高重组大肠杆菌中顺丁烯二酸异构酶表达量，通过正交试验设计，对工程菌的生长条件和目的蛋白可溶表达条件进行优化.采用250ml三角瓶中装有50ml（amp100mgl-1）的培养基，分别研究培养基中葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉的浓度，培养基ph值以及摇床转速、装液量、接种量等对蛋白可溶表达量的影响.确定顺丁烯二酸异构酶工程菌最优化培养基为：蛋白胨20gl-1、酵母浸粉2.5gl-1、k2hpo4?3h2o3.0gl-1、kh2po41.5gl-1、nacl6gl-1、mgso43gl-1，培养基ph调至6.5.确定顺丁烯二酸异构酶工程菌可溶性表达最优条件为：37℃下培养至d600nm值为1.0时，添加终浓度为0.05mmoll-1的iptg进行诱导，诱导温度37℃，摇床转速220rmin-1，装液量20%，接种量5%，诱导时长为6h.利用bioflo415发酵罐以最优化的培养基和发酵条件对该工程菌进行了3批发酵实验，与摇瓶实验相比，顺丁烯二酸异构酶的表达量提高了近1.5倍，单位发酵液的酶活力由46uml-1发酵液提高到78uml-1发酵液.以上数据为顺丁烯二酸异构酶重组工程菌的中试发酵奠定了基础.图7表2参17
%K 顺丁烯二酸异构酶
%K 发酵条件优化
%K 重组工程菌
%K 正交试验设计
%K 酶活力
%U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201101030