%0 Journal Article %T 嗜热子囊菌光孢变种内切葡聚糖酶i基因在毕赤酵母中的表达及部分酶学性质 %A 张亚波 %A 刘连盟 %A 徐荣燕 %A 李多川 %J 应用与环境生物学报 %P 419-422 %D 2009 %R 10.3724/SP.J.1145.2009.00419 %X 摘要嗜热子囊菌是一种嗜热真菌,可以产生具有很高工业价值的内切葡聚糖酶.本研究成功表达了嗜热子囊菌内切葡聚糖酶ⅰ基因,并获得热稳定的重组内切葡聚糖酶.提取嗜热子囊菌光孢变种(thermoascusaurantiacusvar.levisporus)总rna,通过rt-pcr方法克隆出内切-β-葡聚糖酶eg1基因的成熟肽编码序列.采用基因重组的方法构建该基因的巴斯德毕赤酵母pichiapastoris分泌型表达载体ppic9k-eg1,经线性化后采用电穿孔法将其导入毕赤酵母gs115中,大量筛选后获得高效表达内切葡聚糖酶ⅰ的毕赤酵母工程菌株gpn24.该菌株采用甲醇诱导120h后,内切葡聚糖酶ⅰ的活力可达570.7u/ml,最适温度为55℃,在90℃的条件下保温30min后仍具有60%的酶活力;最适ph为5.0,在ph3.0~5.0的条件下酶活力保持稳定.图6表2参16 %K 纤维素酶 %K 内切葡聚糖酶 %K 嗜热子囊菌光孢变种 %K 嗜热真菌 %K 毕赤酵母 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=5184