%0 Journal Article %T 苹果火疫解淀粉欧文氏usaw004菌株harpineausaw004基因的克隆和高效表达 %A 郭鲁宏 %A 吴彦 %A 吴伯骥 %J 应用与环境生物学报 %P 986-989 %D 2013 %R 10.3724/SP.J.1145.2013.00986 %X 从感染火疫病的苹果幼芽中分离纯化解淀粉欧文氏erwiniaamylovora菌株usaw004.该菌株能引起非寄主植物烟草叶片过敏反应.通过构建usaw004基因组文库和菌落原位杂交方法,从usaw004基因组文库中成功筛选到harpineausaw004基因的阳性克隆,并将其亚克隆到pbluescript-iisk(+).测定阳性克隆片段核苷酸序列harpineausaw004基因的orf长度为1212bp,转录产物harpineausaw004由403个氨基酸残基组成.将harpineausaw004基因克隆到表达载体pet28a(+)的t7启动子下,成功构建了高效表达质粒pt7-harpineausaw004,在大肠杆菌jm109中,经异丙基硫代-β-d半乳糖苷(iptg)诱导harpineausaw004基因高效表达,其表达产物可以诱导烟草叶片产生典型过敏反应症状. %K 欧文氏菌 %K 克隆 %K harpineausaw004基因 %K harpineausaw004蛋白 %K 植物过敏反应 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201311050